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臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)-磁(ci)納米傳感(gan)器快(kuai)檢(jian)技術
隨著納米技術(shu)的發展,生(sheng)物功能化(hua)超順(shun)磁性納米顆粒(li)(連接有不(bu)同(tong)生物分(fen)子,如核酸(suan)、小(xiao)分子、多肽、抗(kang)體),在(zai)生物(wu)富集、識別等方(fang)面(mian)得(de)到(dao)廣(guang)泛(fan)的發展。生(sheng)物功能化(hua)磁珠富集在(zai)生物(wu)大分子上,引起體系(xi)中(zhong)橫向(xiang)弛豫(yu)時間(T2)的變化(hua)。采用臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)低場核磁共(gong)振(zhen)(LF-NMR)法(fa)可(ke)敏(min)感(gan)地檢(jian)測(ce)到(dao)這壹(yi)變(bian)化(hua)。將兩者結(jie)合(he)可(ke)以(yi)構建壹(yi)種新型(xing)的,具(ju)有極(ji)低檢(jian)測(ce)限、特(te)異(yi)性強(qiang)、快(kuai)速(su)等特(te)點(dian)的生物(wu)分(fen)子識別方法(fa)。目(mu)前,臺式(shi)小(xiao)核磁(ci)結(jie)合(he)磁(ci)納米開關這壹(yi)技(ji)術(shu)已(yi)經應用於(yu)毒(du)素(su)、病(bing)毒(du)、細菌等的檢(jian)測(ce)中(zhong)。
臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)-磁(ci)納米傳感(gan)器快(kuai)檢(jian)技術基(ji)本(ben)原(yuan)理(li) 磁納米傳感(gan)器探測(ce)機(ji)制的基(ji)本(ben)原(yuan)理(li)是基(ji)於(yu)選(xuan)擇(ze)性納米顆粒(li)與(yu)靶(ba)標(biao)相(xiang)互作(zuo)用時(shi)在(zai)分散(san)和(he)聚集狀態(tai)之(zhi)間(jian)切換的能力(li),狀態(tai)轉變(bian)伴(ban)隨著溶液水質子的自旋(xuan)-自旋(xuan)弛豫(yu)時間(T2)的變化(hua)。通過(guo)臺式(shi)小(xiao)核磁(ci)可(ke)以(yi)敏(min)感(gan)的捕獲(huo)這壹(yi)變(bian)化(hua),從而實現對(dui)靶(ba)標(biao)的快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)。
臺式(shi)小(xiao)核磁(ci)-磁(ci)納米傳感(gan)器快(kuai)檢(jian)技術用於(yu)細菌檢(jian)測(ce)案(an)例 下(xia)圖(tu)顯(xian)示(shi)不(bu)加(jia)菌液(ye)的樣品(pin)(對(dui)照組(zu)磁(ci)珠)和(he)加(jia)入(ru)沙門氏(shi)菌的樣品(pin)(磁(ci)珠+沙門氏(shi)菌)臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)檢(jian)測(ce)到(dao)的T2值差異,表(biao)明此(ci)方法(fa)可(ke)以(yi)用來(lai)對(dui)目標(biao)微生(sheng)物(wu)進行(xing)檢(jian)測(ce)。
為了研(yan)究(jiu)不(bu)同(tong)細菌濃(nong)度對(dui)檢(jian)測(ce)方法(fa)的影響(xiang)和(he)檢(jian)測(ce)方法(fa)的靈敏(min)度,以(yi)6種不(bu)同(tong)濃(nong)度的沙門氏(shi)菌作(zuo)為檢(jian)測(ce)對(dui)象(xiang),磁珠濃(nong)度固(gu)定(ding)為0.14mg/mL。結(jie)果(guo)如(ru)下(xia)圖(tu)所示(shi),當(dang)細菌濃(nong)度從(cong)100cfu/mL變(bian)化(hua)到(dao)10000cfu/mL,相(xiang)應的ΔT2值從(cong)43變(bian)化(hua)到(dao)5。當(dang)阪崎腸(chang)桿(gan)菌濃(nong)度低至1cfu/mL時(shi),ΔT2值(zhi)仍(reng)然(ran)很(hen)高(ΔT2=34ms),說(shuo)明了在(zai)菌濃(nong)度很(hen)低的情況下(xia),仍能檢(jian)測(ce)出目(mu)標(biao)菌,表(biao)明臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)檢(jian)測(ce)方法(fa)有很(hen)高靈(ling)敏(min)度。
借(jie)助臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)低場核磁共(gong)振(zhen)儀(yi),結(jie)合(he)納米傳感(gan)器,能快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)出樣(yang)本(ben)中(zhong)的目標(biao)菌,由(you)於(yu)免(mian)疫(yi)學(xue)特(te)異(yi)性結(jie)合(he)的特(te)性,該方法(fa)對(dui)檢(jian)測(ce)靶(ba)標(biao)物(wu)有*的靈敏(min)度與(yu)特(te)異(yi)性。同(tong)時,試(shi)驗(yan)所(suo)用的試(shi)劑簡單、普(pu)遍(bian),能應用於(yu)不(bu)透(tou)明、復(fu)雜的食品(pin)介(jie)質。
臺(tai)式(shi)小(xiao)核磁(ci)-磁(ci)納米傳感(gan)器分析技術檢(jian)測(ce)的分析(xi)物(wu)類別。
1、病毒(du)[46]
2、小(xiao)分子,肽[23,63,65]
3、DNA,mRNA[1,45,46,66,67]
4、過(guo)氧化(hua)物酶[48]
5、蛋(dan)白酶[45,47,68]
6、端粒(li)酶(mei)[66]
7、甲基(ji)化(hua)酶[46]
8、激素[69,70]
9、離子[60,71,72]
10、細菌細胞(bao)[23,48]
11、蛋(dan)白質[23,45,49,61,69]
12、免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白[19]
13真核(he)細胞(bao)[23]
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【參(can)考資(zi)料(liao):[1]李(li)先富, 陳艷(yan), 張之(zhi)韻(yun),等. 食源(yuan)性致(zhi)病菌低場磁共振(zhen)快(kuai)速(su)篩選(xuan)檢(jian)驗(yan)方(fang)法[J]. 中(zhong)國食品(pin)學(xue)報(bao), 2013(03):171-175.】